یون

لینک دانلود و خرید پایین توضیحات

فرمت فایل word  و قابل ویرایش و پرینت

تعداد صفحات: 35

تنظیم ترکیبات یونی و PH میان سلولی :

توزیع و انتشار ویژه ای از یونها در سراسر غشاء پلاسمای سلولهای یوکاریوتیک ewkaryotic وجود دارد که از طریق مکانیزمهای انتقال فعال یونی و نفوذپذیری یون و غشاء انتخابی انجام می شود . این حالت منجر به تفاوت پتاسین در سراسر غشاء در حدود 70mv در طی شرایط ساکن می شود که نزدیک به پتانسیل ثابت برای پتاسیم است بنابراین گرادیان برای سدیم و کلسیم به داخل سلل هدایت می شوند در حالیکه گرادیان پتاسیم به سمت خارج است . منیزیم یونیزه شده تقریبا بطور مساوی و یکسان در سراسر غشاء پلاسمایی منتشر می شود گرچه به علت پتانسیل منفی ساکن مقدار آن از میزان ثابت الکتروشیمیایی بیشتر است . محدوده فیزیولوژیکی این یونها در بدنه خارج سلولی و داخل سلولی در جداول 6-1 ارائه شده است .

تعادل یون بهینه شده برای متابولیسم ، رشد معمولی و عملکرد سلولها لازم و اساسی است مکانیزمهای موثر غلظت یون را در میان طیف های باریک خود تنظیم و کنترل می کنند به این دلیل سلولهای یوکاریوت شامل کانالها و ناقلهای یونی مختلفی در غشاء هستند علاوه بر این مکانیزمها ارتباط نزدیکی با تنظیم و کنترل حجم و PH درون سلولی دارند.

پتاسیم :

پتاسیم یکی از کاتیونهای بسیار فراوان بدن است ، بالغ بر 3500 تا 4000 میلی مول در کل است . مقدار کلی مرتبط با جرم چربی آزاد بدن است و در حدود 50-70 است . از کل پتاسیم بدن 98% در خارج سلول واقع شده است در حالیکه باقی مانده در بدنه های مختلف خارج سلولی (فاصله بافت و غشاء 40mmol – مابع میان سلولی 35mmol ، پلاسما 40mmol ) این گرادیان پتاسیم برای تنظیم حجم سلول به علاوه برای تحریک پذیری سلولهای عصبی و ماهیچه ای بسیار اهمیت دارد .

پروتئینهای غشاء تنظیم کننده پتاسیم:

توزیع و انتشار نامتعادل پتاسیم غالبا نتیجه فرایندهای انتقال فعال At pox سدیم – پتاسیم است . علاوه بر این توزیع و انتشار آن بستگی به تراوش پذیری و نفوذپذیری غشاء پلاسما برای پتاسیم دارد که متاثر از مسیرها و کنالهائی مختلف انتقال پتاسیم است . از اینرو تعادل پتاسیم درون سلولی بطور عالی از طریق ساختارهای مختلف حاصل پتاسیم نظیر پمپ های یونی ،‌کانالهای پتاسیم و ناقلهای پتاسیم تنظیم و کنترل می شود .

جدول 6-1

توزیع یونها در سراسر غشاء پلاسمایی گلبولهای قرمز خون

غلظت برون سلولی

غلظت درون سلولی

یون

پتاسیم

؟؟؟؟؟؟؟؟؟؟؟؟

؟؟؟؟؟؟؟؟؟

سدیم

؟؟؟؟؟؟؟؟؟؟؟؟

؟؟؟؟؟؟؟؟؟؟؟؟

کلسیم

؟؟؟؟؟؟؟؟؟

منیزیم

؟؟؟؟؟؟؟؟؟

؟؟؟؟؟؟؟؟

؟؟؟؟؟؟؟؟

مهمترین مورد در خصوص ورزش در پاراگرافهای بعدی آمده است

- کانالهای پتاسیم :

کانالهای پتاسیم بزرگترین و متنوع ترین زیر مجموعه ای از کانالهای یونی است در یک بررسی و تجدید نظر ،‌در کانال اصلی پتاسیم عبارتند از کانالهای پتاسیم حساس به ولتاژ و کانالهای یکسوساز پتاسیم داخلی هر دو نوع کانالها شامل چهار زنجیره یا زیر واحد پپتید هستند که به صورت همگن یا ناهمگن با هم در ارتباط هستند تا مسیر نفوذ تراوش را در سراسر غشاء تشکیل دهند . زنجیره های پپتید در کانالهای پتاسیم یکسو ساز در داخل سلول شامل دو مارپیچ در یک طرف غشاء با بخشی از آمینواسیدهای کوچک میان آنها می باشد . این وضعیت لوپ p نامیده می شود . زیرا آن داخل غشاء بدون اینکه کاملا آنرا قطع کرده باشد قرار دارد چنین ساختاری ویژگی مشخصه تمام انواع کانالهای پتاسیم است .

کانالهای پتاسیم حساس به ولتاژ

در این نوع کانال (kv) چهار زنجیره اضافی پپتید جلوتر از دو حلقه مارپیچ میان غشائی قرار دارد که شامل واحدهای حساس به ولتاژ هستند کانالهای حساس به ولتاژ تفاوت زیاد در حساسیت پذیری ولتاژ و فعال سازی انرژی جنبشی را نشان می دهد . حداقل 22ژن مختلف دارای کد و رمز برای این نوع کانالهای در پستانداران شناسایی شده است . در صورتیکه انواع زیادی توسط عملیات پیوند و دایمر کردن نامشابه تولید شده اند . یک نمونه کانال پتاسیم یکسو ساز تاخیری است که تقریبا در تمام غشاء های تحریک پذیر وجود دارد . این کانال به محض اینکه غشاء قطبش زدایی شد پس از یک تاخیر کوتاه باز می شود . بدین وسیله پتانسیل بازگرداننده به سطح ساکن بر می گردد. گروه دیگر از کانالهای پتاسیم ورودی ولتاژ توسط کانالهای پتاسیم فعال شده کلسیم نمایان می شوند . این نوع از کانالها توسط افزایش و یا قطبش زدایی کلسیم فعال شده فعال می شوند کانالهای پتاسیم فعال شده کلسیم حداقل سه زیر مجموعه به علت خاصیت رسانایی آنها تقسیم می شوند . بزرگ (200-300ps) توسط 20-60ps و کوچک 10-14ps احتمال بازشدن کانال توسط میزان زیادی از غلظت کلسیم درون سلولی درصد را 50mmol تا0/5 تنظیم می شود که تنوع سایت ها و مکانهای اتصال کلسیم های تنظیم کننده را نشان می دهد و نقش این کانالها تنها تحت شرایط افزایش غلظت کلسیم درون سلولی در طی فعالیت های مداوم عضلانی و یا در ضمیرهای تحلیل رفته مشخص می شود.

کانالهای پتاسیم یکسو ساز داخلی

اجزاء بین کانالها دارای یک خاصیت مشترک هستند و همه در تنظیم توسط مدولاتورهای مختلف داخل سلولی و یا پیک های داخل سلولی نظیر کلئوتیدها ، فسفرلیپیدها ، یکفازها ، پلی آمیدها ، PH و پروتئین G سهیم هستند کانالهای پتاسیم یکسوکننده داخلی به خوبی و درستی تحریک پذیری غشاء را تنظیم می کنند . باز شدن کانال پتاسیم غشاء و را نزدیک پتانسیل متعادل پتاسیم به توازن می رساند . در این حالت سلول دارای حداقل تحریک پذیری است . جزء دیگر گروه keir کانال پتاسیم حساس ATP است . این نوع کانال نمونه ای است که چگونه متابولیسم و تحریک پذیری می توانند با هم در ارتباط باشند . از نظر متابولیکی ، فیبرهای عضله تحلیل رفته کاهش در غلظت ATP سیتوسولیک به علاوه در PH ناشی از افزایش زیاد رسانایی پتاسیم در غشاء است که به علت بازشدن کانالهای پتاسیم حساس ATP اتفاق می افتد اینگونه فرض می شود که در ارتباط با مصرف ناکافی پتاسیم از طریق na-k-Atpuse باعث کاهش ظرفیت غشاء سلولی برای تولید پتانسیل فعال همراه با کاهش نیرو می شود.

دانلود تحقیق بروسلوزیز

لینک دانلود و خرید پایین توضیحات

فرمت فایل word  و قابل ویرایش و پرینت

تعداد صفحات: 18

بروسلا شامل باکتریهای گرم منفی، داخل سلولی اختیاری هستند که باعث بروز بروسلوزیز در حویانات بخصوص گاو، گوسفند و بز می گردد. انسان با مصرف گوشت و فرآورده های لبنی دامهای آلوده، به بروسلوزیز مبتلا می گردند. برویلوزیز در دامها باعث ناباروری و سقط جنین و در انسان باعث بروز تب مواج، مننژیت، آرتریت و آندوکلوویت میگردد. بروسلوزیز هنوز از جمله عفونتهای شایع در کشورهای در حال توسعه و حتی برخی کشورهای پیشرفته بشمار می آید.

امروزه با کنترل این بیماری بر سه پایه کشتن دامهای آلوده، پاستوریزاسیون و واکسناسیون می باشد. واکسیناسیون دامها کبر اساس تلقیح سویه های زنده ضعیف شده بروسلا آبورتوس (45/20 و 19S) و بروسلاملی تنسیس (Rev1) است. استفاده از این واکسنها در دامها با محدودیتهایی روبرو است. تحریک تولدی آنتی بادی در دامهای واکسینه که مانع از تفکیک آنها از دامهای مبتلا می گردد، همچنین بروز سقط جنین و ابتلا به بروسلوزیز در این حیوانات باعث شده است تا تلقیح این واکسنها در انسان ممنوع و در دامها با احتیاط انجام شود.

با توجه به مشکلاتی که در اثر واکسیناسیون دامها بوجود آمده است، تحقیقات گسترده ای در زمینه طراحی واکسنهای جدید در دست می باشد. این تحقیقات در سه راستای کلی زیر جهت یافته اند.

استفاده از سویه های زنده ضعیف شده خشن نظیر RB51

تلقیح زیر واحدهای پروتئینی ایمنی زا و یا باکتریهای کشته شده

استفاده از روشهای نوین واکسیناسیون نظیر DNA واکسنها

با اینکه نتایج تحقیقات مربوط به سویه های زنده ضعیف شده خشن (RB51) حاکی از موفقیت این سویه ها در کنترل بیماری است ولی هنوز بررسی این واکسنها بمراحل نهایی هود نرسیده است. ایمنی زایی آنتی ژنهای مختلفی از بروسلا بشکل طبیعی و یا نو ترکیب بررسی شده اند. از جمله این آنتی ژنها می توان HtrA، GroEL، GroES، CuZnSoD، yajc، uvrA، L7/L12 و P39 را نام برد. این بررسی نشان می دهند که تنها سه آنتی ژن P39، L7/L12 و Cu,ZnSoD توانایی تحریک پاسخهای ایمنی سلولی و هومورال را دارند. با توجه به شکل حیات بروسلا در داخل بدن که بصورت سلولی است، تنها پاسخهای ایمنی سلولی بخصوص پاسخهای سیتوتوکسیک قادر به حذف این باکتری از بدن می باشند. بنابراین واکسنهایی که بتوانند این پاسخها را تحریک کنند توانایی بروسلوزیز را دارند. در این پاسخها لمفوسیتهای T از نوع Th1 القا می شوند که در منیجه ترشح سیتوکانیهایی از جمله انترفرون گاما را می توان از این سلولها مشاهده نمود. در بروسلوزیز تحریک پاسخهای Th2 که باعث تولید آنتی بادیها می گردد علاوه بر اینکه در بهبودی اثر چندانی ندارند بلکه حتی ممکن است روند بیماری را به سوی مزمن شدن سوق دهند.

تحقیقاتی که برروی واکسنهای آنتی ژنتیک و یا حتی فرم کشته شده بروسلا انجام شده است ثابت می کند که این عوامل قادر به تحریک پاسخهای ایمنی سلولی نیستند. بطور کلی اینگونه واکسنها قادر به تولید پروتئینها در داخل سلولهای عرضه کننده آنتی ژن (APC) نیستند، درنتیجه توانایی تحریک پاسخهای سیتوتوکسیک را ندارند.

امروزه برای حل این مشکلات از روشهای جدید عرضه آنتی ژن به بدن استفاده شده است تا تحریک پاسخهای ایمنی سلولی مناسب را برای حذف عوامل داخلی سلولی بهمراه داشته باشد. از جمله این روشها DNA واکسیناسیون است که بسیاری داز مشکلات و مسایل مربوط به آزادسازی آنتی ژن در بدن را حل نموده است. درذ این واکسنهای بیان آنتی ژن تحت کنترل یک پروموتور قوی است که توانایی ابراز آن را در سلولهای یوکاریوتیک دارند.

DNA واکسنها طیف وسیعی از پاسخهای ایمنی ازجمله سلولهای سیتوتوکسیک، سلولهای T کمکی و آنتی بادیها را تحریک می کند. با اینکه مکانیزم دقیق عملکرد این واکسنها مشخص نشده است ولی فرضیاتی مبنی بر تحریک پاسخهای ایمنی ما این روش مطرح است. بیان آن مورد نظر و تولید پروتئین و در نهایت جذب این پروتئینها توسط سلولهای عذضه کنندة آنتی ژن (APC) باعث میشود تا شاخصهای آنتی ژنتیک در کنار سلولهای mHCII عرضه و درنتیجه با فعال شدن سلولهای کمکی T با تولید آنتی بادی را بهمراه داشته باشد. تحریک پاسخهای ایمنی سلولی و بخصوص پاسخهای سیتوتوکسیک با واسطه پدیده Cross-Priming انجام می گیرد.

در این پایان نامه، هدف مطالعه قدرت ایمنی زایی پروتئینهای حاصل از ژنهای P39، L7/L12 و بروسلا آبورتوس در موش Balb/c است. روش ارائه این آنتی ژنها به بدن با استفاده از DNA واکسیناسیوم استن. ایمنی زایی هر یک از ژنهای فوق مبتلا بصورت مجزا مورد بررسی قرار گرفته است. ولی تا کنون ایمنی زایی تجویز همزمان ایندوژن مطالعه نشده است. در گروههای واکسینه (سه گروه) بترتیب پلاسمیدهای PcDNA3-L7/L12، PcDNA-P39 و PcDNA3-P39+PcDNA3L7/L12 بصورت عضلاتی تزریق شده است. اندازه گیری آنتی